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技術文章
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2025-1021
一、材料、設備及試劑（一）材料含pBS的E.coliDH5α或JM系列菌株，1.5ml塑料離心管(又稱eppendorf管)，離心管架。（二）設備微量取液器(20μl,200μl,1000μl)，臺式高速離心機，恒溫振蕩搖床，高壓蒸汽消毒器(滅菌鍋)，渦旋振蕩器，電泳儀，瓊脂糖平板電泳裝置和恒溫水浴鍋等。（三）試劑LB液體培養基(Luria-Bertani)：稱取蛋白胨(Tryptone)10g，酵母提取物(Yeastextract)5g，NaCl10g，溶于800ml去離子...
查看更多2025-1021
一、載體與質粒的基本定義載體（Vector）指通過重組DNA技術，將有用的目的DNA片段送入受體細胞進行繁殖和表達的工具，細菌質粒是其中常用類型。質粒（Plasmid）的基本特征結構：染色體外的雙鏈、閉環DNA分子，大小1-200kb，以超螺旋狀態存在于宿主細胞。存在范圍：主要存在于細菌、放線菌和真菌細胞中。功能：具有自主復制和轉錄能力，能在子代細胞中保持恒定拷貝數并表達遺傳信息。宿主依賴：復制和轉錄需依賴宿主細胞的酶和蛋白質，離開宿主無法存活；但宿主無質粒也可正常存活。天然...
查看更多2025-1020
熒光定量PCR儀是一種基于聚合酶鏈式反應（PCR）和實時熒光檢測技術的分子生物學工具，它能夠精確測量DNA或RNA的濃度變化。以下是關于其工作原理與檢測技術的詳細解析：熒光定量PCR儀工作原理:1.PCR擴增過程高溫變性：將雙鏈DNA解旋為單鏈狀態，以便后續引物結合。低溫退火：引物與模板DNA互補配對，形成穩定的雜交體。適溫延伸：在Taq酶的作用下，以引物為基礎合成新的DNA片段。2.熒光信號實時監測染料法（如SYBRGreenI）：嵌入到雙鏈DNA中的熒光染料會發出熒光，隨...
查看更多2025-1017
熒光定量PCR儀結果穩定的因素及保障措施：1.結構設計與制造工藝的優化抗干擾的機械構造：采用減震材料和精密加工工藝打造的機身框架，有效隔絕外部環境中的振動源。穩定的物理平臺減少了光學元件位移帶來的信號漂移，確保長時間運行下的基線平穩性。模塊化組件布局：關鍵部件（如光源、檢測器）采用模塊化設計，便于維護更換且相互獨立工作。這種隔離式架構防止局部故障擴散至整個系統，增強了整體穩定性。2.熒光定量PCR儀嚴格的校準體系與質控標準三維校準機制：定期對儀器進行硬件性能校準（包括溫度、時...
查看更多2025-1016
尿液樣本的STD（性傳播疾病）檢測主要涵蓋PCR2、PCR11、PCR15以及PCR15+HPV14通道的檢測需求，這對熒光定量PCR儀的性能參數和適配性提出了多重挑戰——既要應對尿液基質復雜的背景干擾，又要實現HPV14型分型與衣原體、支原體等多病原體的同步檢測，同時需滿足合規性與批量檢測需求。針對這一應用場景，客戶常常存在以下疑惑：我們的核心檢測場景是尿液樣本，這類樣本基質相對復雜，可能存在背景干擾，同時需要兼顧多靶標的同步檢測—比如HPV14型的分型（需區分不同高危/低...
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